VOLUMEN I

fisiológica (SR). Disolver completamente agitando
mecánicamente durante 30 minutos.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) -
Cromatografiar la Solución estándar y registrar las
respuestas de los picos según se indica en Procedimiento:
la resolución R entre los picos correspondientes
a la solución fisiológica (SR) y al tricloroaminoplatinato
no debe ser menor de 2,0; la desviación
estándar relativa para inyecciones repetidas no
debe ser mayor de 3,0 %.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20 µl) de la Solución estándar y la Solución muestra,
registrar los cromatogramas y medir las respuestas
de los picos de tricloroaminoplatinato. Los
tiempos de retención relativos deben ser aproximadamente
1,0 para cisplatino (en el volumen muerto)
y 5,0 para tricloroaminoplatinato. Calcular el porcentaje
de tricloroaminoplatinato en la porción de
Cisplatino en ensayo, relacionando las respuestas de
los picos de tricloroaminoplatinato obtenidos a
partir de la Solución muestra y la Solución estándar,
respectivamente. No debe contener más de
1,0 %.
Límite de transplatino
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatógrafía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
25 cm 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por gel de sílice irregular de 10 µm de diámetro,
totalmente poroso, químicamente unida a un revestimiento
de intercambio catiónico fuertemente ácido.
Mantener la columna a 45 °C. El caudal debe
ser aproximadamente 2,0 ml por minuto. Acondicionar
la columna haciendo pasar Fase móvil con
un caudal de 2,0 ml por minuto durante 30 minutos,
luego a 0,5 ml por minuto durante 30 minutos y
luego nuevamente a 2,0 ml por minuto durante
30 minutos.
Fase móvil - Preparar una solución de fosfato
monobásico de potasio 0,18 M. Ajustar con ácido
fosfórico a pH 3,2. Filtrar y desgasificar. Hacer los
ajustes necesarios (ver Aptitud del sistema en 100.
Cromatografía).
Solución madre del estándar - Pesar exactamente
alrededor de 10 mg de Transplatino SR-FA,
transferir a un matraz aforado de 200 ml, completar
a volumen con solución fisiológica (SR) y agitar
mecánicamente durante 30 minutos para disolver.
Solución estándar de trabajo - Transferir 5,0 ml
de Solución madre del estándar a un matraz aforado
de 25 ml que contenga aproximadamente 12 mg de
Cisplatino SR-FA. Completar a volumen con solución
fisiológica (SR) y agitar mecánicamente durante
30 minutos para disolver.
Solución estándar - Transferir 10,0 ml de Solución
estándar de trabajo a un matraz aforado de
50 ml. Agregar 5,0 ml de una solución de tiourea
1 en 200, recientemente preparada, y 5,0 ml de
ácido clorhídrico 1 N. Completar a volumen con
solución fisiológica (SR) y mezclar. Transferir
aproximadamente 10 ml de esta solución a un recipiente
con tapa, revestida con politetrafluoroetileno
y calentar a 60,0 ± 0,5 °C durante 60 minutos.
Enfriar a temperatura ambiente.
Solución madre de la muestra - Pesar exactamente
alrededor de 50 mg de Cisplatino, transferir a
un matraz aforado de 100 ml, completar a volumen
con solución fisiológica (SR) y agitar mecánicamente
durante 30 minutos para disolver.
Solución muestra - Transferir 10,0 ml de Solución
madre de la muestra a un matraz aforado de
50 ml y proceder según se indica para Solución
estándar, comenzando donde dice "Agregar 5,0 ml
de una solución de tiourea 1 en 200...".
Solución de resolución - Transferir aproximadamente
10 mg de Cisplatino SR-FA a un matraz
aforado de 200 ml, completar a volumen con solución
fisiológica (SR) y agitar mecánicamente durante
30 minutos para disolver. Transferir 10,0 ml de
esta solución y 10,0 ml de Solución madre del
estándar a un matraz aforado de 50 ml. Proceder
según se indica para Solución estándar, comenzando
donde dice: "Agregar 5,0 ml de una solución de
tiourea 1 en 200... ".
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía )-
Cromatografiar la Solución estándar y registrar las
respuestas de los picos según se indica en Procedimiento:
el tiempo de retención del transplatino
derivatizado debe ser entre 5,0 y 9,0 minutos (de no
ser así, hacer los ajustes necesarios en la Fase móvil
y acondicionar la columna nuevamente). La eficiencia
de la columna no debe ser menor de 2.500
platos teóricos; la desviación estándar relativa para
inyecciones repetidas no debe ser mayor de 4,0 %.
Cromatografiar la Solución de resolución y registrar
las respuestas de los picos según se indica en Procedimiento:
la resolución R no debe ser menor de
1,7.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20 µl) de la Solución muestra y la Solución estándar,
registrar los cromatogramas y medir las respuestas
de los picos de transplatino. Los tiempos de
retención relativos deben ser aproximadamente 1,0
para cisplatino y 1,3 para transplatino. Calcular el
porcentaje de transplatino en la porción de Cisplatino
en ensayo, relacionando las respuestas de los
picos de transplatino obtenidos a partir de la Solución
muestra y la Solución estándar. No debe contener
más de 2,0 %.