VOLUMEN I

Revelador 1 - Solución al 1% de difenilborinato
de 2-aminoetilo en metanol.
Revelador 2 - Solución al 5 % de polietilenglicol
4.000 en etanol.
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la
placa cromatográfica, en bandas, 10 µl de la Solución
muestra y 10 µl de la Solución estándar. Dejar secar
las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta
que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente
tres cuartas partes de la longitud de la placa.
Retirar la placa de la cámara, marcar el frente del
solvente y dejar que el solvente se evapore. Pulverizar
sobre la placa con Revelador 1. Dejar secar al
aire. Pulverizar sobre la placa con Revelador 2, dejar
secar nuevamente al aire. Examinar el cromatograma
bajo luz ultravioleta a 366 nm. En el cromatograma
se deben observar dos bandas de fluorescencia rojovioláceas
debido a la presencia de hipericina con un
valor de R f aproximadamente de 0,85 y pseudohipericina
con un valor de R f aproximadamente de 0,80;
varias zonas con una fluorescencia amarillo anaranjada,
una de las cuales coincide en valor de R f y color
con la banda de hiperósido con un valor de R f 0,50
presente en la Solución estándar. El cromatograma
de la Solución muestra debe presentar una zona de
fluorescencia azul que coincide en posición y color
con la banda del ácido clorogénico con un valor de R f
aproximadamente de 0,40 presente en la Solución
estándar.
Cenizas totales (ver 630. Métodos de Farmacognosia)
Debe cumplir con los requisitos.
Determinación de aflatoxinas
Debe cumplir con los requisitos.
Materia extraña (ver 630. Métodos de Farmacognosia)
No debe contener más de 3,0 % de tallos con un
diámetro superior a 5 mm y no más de 2 % de otras
materias extrañas.
Pérdida por secado
No debe perder más de 10,0 %, determinado sobre
1,0 g de Hipérico pulverizado y secado en estufa entre
100 y 105 °C durante 2 horas.
VALORACIÓN
Preparación muestra - Pesar y reducir a polvo fino
5,0 g de Hipérico y transferir 800 mg del polvo,
exactamente pesado, a un balón de 100 ml. Agregar
60 ml de una mezcla de tetrahidrofurano y agua
(80:20) y agitar. Calentar la mezcla a ebullición en
baño de agua a 70 °C a reflujo durante 30 minutos.
Centrifugar durante 2 minutos a 2.000 rpm y transferir
el sobrenadante en un matraz de 250 ml. Suspender el
residuo con 60 ml de una mezcla de tetrahidrofurano
y agua (80:20). Transferir al balón y repetir la operación
por 30 minutos más. Centrifugar durante
2 minutos a 2.000 rpm y reunir los sobrenadantes.
Evaporar hasta sequedad. Disolver el residuo con
15 ml de metanol ayudándose con ultrasonido y llevar
a un matraz aforado de 25 ml. Lavar el matraz de
250 ml con metanol y completar a volumen de 25 ml
con el mismo solvente. Filtrar y descartar los primeros
2 ml del filtrado. Transferir 5 ml del filtrado a un
matraz aforado de 25 ml y completar a volumen con
metanol.
Procedimiento - Medir la absorbancia de la Preparación
muestra a 590 nm por comparación empleando
como blanco metanol. Calcular el contenido en
porcentaje de hipericina en la porción de Hipérico en
ensayo por la fórmula siguiente:
(125/870)(A/P)
en la cual A es la absorbancia de la Solución muestra
a 590 nm; P es el peso de Hipérico en mg y 870 es el
coeficiente de extinción específica E (1 %, 1 cm) de
hipericina (ver 470. Espectrofotometría ultravioleta y
visible).