VOLUMEN I

tador, con un caudal de aproximadamente 7,5 ml
por minuto. Programar el cromatógrafo del siguiente
modo:
Tiempo
(minutos)
Temperatura
(ºC)
Columna 0 - 2 50 80
2-8 80 240
Cámara de
inyección
220
Detector 280
Solución del estándar interno - Diluir 5 ml de
alcohol n-propílico a 100 ml con agua.
Solución muestra - Pesar alrededor de 120 mg
de Ivermectina, transferir a un tubo de centrífuga y
disolver en 2 ml de m-xileno, si es necesario calentar
en un baño de agua entre 40 y 50 ºC. Agregar
2 ml de agua, mezclar y centrifugar. Separar la
capa superior, transferirla a otro tubo y extraer con
2 ml de agua. Descartar la fase superior y combinar
las fases acuosas. Agregar 1 ml de Solución del
estándar interno, centrifugar y descartar el m-xileno
residual.
Solución estándar A - Diluir 3,0 g de Alcohol
Absoluto a 100 ml con agua.
Solución estándar B - Diluir 1,0 g de formamida
a 100 ml con agua.
Solución estándar C - Diluir 5 ml de la Solución
estándar A y 5 ml de la Solución estándar B a
50 ml con agua. Transferir 2 ml de esta solución a
un tubo de centrífuga, agregar 2 ml de m-xileno,
mezclar y centrifugar. Separar la capa superior,
transferir a otro tubo y extraer con 2 ml de agua.
Descartar la capa superior y combinar las capas
acuosas. Agregar 1 ml de la Solución del estándar
interno, centrifugar y descartar el m-xileno residual.
Solución estándar D - Diluir 10 ml de la Solución
estándar A y 10 ml de la Solución estándar B a
50 ml con agua. Proceder según se indica para
Solución estándar C comenzando donde dice
“Transferir 2 ml de...”.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
1 l) de la Solución muestra y las Soluciones estándar
C y D, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de todos los picos: no debe contener más
de 5,0 % de alcohol y no más de 3,0 % de formamida.
Límite de metales pesados
Método VI. Preparar la Solución muestra a partir
de 1,0 g de Ivermectina y la Solución estándar
empleando 2 ml de Solución estándar de plomo
(10 ppm). No más de 0,002 %:
Determinación de agua
Titulación volumétrica directa. No más de
1,0 %, determinada sobre 0,5 g.
Determinación del residuo de ignición
No más de 0,1 %.
VALORACIÓN
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
25 cm 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 5 m de diámetro. El caudal
debe ser aproximadamente 1 ml por minuto.
Fase móvil - Acetonitrilo, metanol y agua
(51:34:15).
Preparación muestra - Pesar exactamente alrededor
de 40 mg de Ivermectina, transferir a un
matraz aforado de 50 ml, disolver y completar a
volumen con metanol.
Preparación estándar A - Pesar exactamente alrededor
de 40 mg de Ivermectina SR-FA, transferir
a un matraz aforado de 50 ml, disolver y completar
a volumen con metanol.
Preparación estándar B - Transferir 1,0 ml de
la Preparación estándar A a un matraz aforado de
100 ml y completar a volumen con metanol.
Preparación estándar C - Transferir 5,0 ml de
la Preparación estándar B a un matraz aforado de
100 ml y completar a volumen con metanol.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) -
Cromatografiar la Preparación estándar A y registrar
las respuestas de los picos según se indica en
Procedimiento: la resolución R entre el primer pico
(componente H 2 B 1b ) y el segundo pico (componente
H 2 B 1a ) no debe ser menor de 3,0; el factor de asimetría
para el pico principal debe ser menor de 2,5.
Cromatografiar la Preparación estándar C y registrar
las respuestas de los picos según se indica en
Procedimiento: la relación señal/ruido para el pico
principal no debe ser menor a 10.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20 l) de la Preparación muestra y la Preparación
estándar A, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de los picos principales. Calcular la
cantidad en porcentaje de Ivermectina
(H 2 B 1a +H 2 B 1b ) y la relación
H 2 B 1a /(H 2 B 1a +H 2 B 1b ), en la porción de Ivermectina
en ensayo.