VOLUMEN I

gar, mientras se agita, una solución de 500 mg de
almidón soluble en 35 ml de agua. Calentar a ebullición
durante 2 minutos y dejar enfriar. [NOTA:
preparar esta solución en el momento de su uso.]
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la
placa 10 µl de Solución estándar y 10 µl de Solución
muestra. Dejar secar las aplicaciones y desarrollar
los cromatogramas hasta que el frente del
solvente haya recorrido aproximadamente tres cuartas
partes de la longitud de la placa. Secar la placa
bajo una corriente de aire hasta evaporación completa
del ácido acético. Pulverizar sobre la placa
con Revelador. Exponer la placa a luz ultravioleta
de 254 nm durante 15 minutos y examinar con luz
diurna. Ninguna mancha correspondiente al ión
nitrato en el cromatograma obtenido a partir de la
Solución muestra debe ser más intensa que la mancha
obtenida con la Solución estándar (0,5 %, calculado
como nitrato de potasio).
Dinitrato de isosorbida y 2-Nitrato de isosorbida
Preparación muestra A, Preparación estándar
B, Preparación estándar C, Preparación estándar
D y Fase móvil - Proceder según se indica en Valoración.
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado entre 210 y 215 nm y una
columna de 25 cm × 4,6 mm con fase estacionaria
constituida por aminopropilmetilsilano químicamente
unido a partículas de sílice de 10 µm de
diámetro. El caudal debe ser aproximadamente 1
ml por minuto.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) -
Cromatografiar la Preparación estándar B y registrar
las respuestas de los picos según se indica en
Procedimiento: ajustar la sensibilidad del equipo
de manera que el pico principal del cromatograma
obtenido a partir de la Preparación estándar B no
sea menor al 20 % de la escala completa del registrador.
Cromatografiar la Preparación estándar D
y registrar las respuestas de los picos según se indica
en Procedimiento: los tiempos de retención deben
ser: aproximadamente 5 minutos para dinitrato
de isosorbida, 8 minutos para 2-nitrato de isosorbida,
11 minutos para 5-nitrato de isosorbida. El
ensayo solo es válido si en el cromatograma obtenido
a partir de la Preparación estándar D, la resolución
R entre los picos correspondientes al 2-nitrato
de isosorbida y al 5-nitrato de isosorbida es mayor
a 4,0.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
10 l) de Preparación muestra A, Preparación
estándar B y Preparación estándar C. En el cromatograma
obtenido a partir de la Preparación
muestra A, la respuesta del pico correspondiente al
2-nitrato de isosorbida no debe ser mayor a la del
pico principal obtenido en el cromatograma de la
Preparación estándar B (0,5 %), y la respuesta del
pico correspondiente al dinitrato de isosorbida no
debe ser mayor a la del pico principal del cromatograma
obtenido a partir de la Preparación estándar
C (0,5 %).
VALORACIÓN
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 230 nm y una columna de
25 cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por aminopropilmetilsilano químicamente unida a
partículas de sílice de 10 µm de diámetro. El caudal
debe ser aproximadamente 1 ml por minuto.
Fase móvil - 2,2,4-Trimetilpentano y alcohol
(85:15). Filtrar y desgasificar. Hacer los ajustes
necesarios (ver Aptitud del sistema en 100. Cromatografía).
Preparación estándar A - Transferir 25,0 mg de
Mononitrato de Isosorbida SR-FA a un matraz
aforado de 25 ml, suspender en 20 ml de Fase
móvil, sonicar durante 15 minutos, y completar a
volumen con Fase móvil. Filtrar la suspensión a
través de un filtro de membrana.
Preparación estándar B - Disolver 10,0 mg de
2-Nitrato de Isosorbida SR-FA en Fase móvil y
diluir hasta 10,0 ml con Fase móvil. Diluir 0,1 ml
de esta solución hasta 20,0 ml con Fase móvil.
Preparación estándar C - Transferir 10,0 mg de
Dinitrato de Isosorbida SR-FA a un matraz aforado
de 20 ml, suspender en 15 ml de Fase móvil, sonicar
durante 15 minutos, y completar a volumen con
Fase móvil. Filtrar la suspensión a través de un
filtro de membrana. Diluir 0,1 ml de esta solución a
10 ml con Fase móvil.
Preparación estándar D - Disolver 5 mg de
Mononitrato de Isosorbida SR-FA y 5 mg de
2-Nitrato de Isosorbida SR-FA en Fase móvil y
diluir hasta 10 ml con Fase móvil. Diluir 1 ml de
esta solución hasta 10 ml con Fase móvil.
Preparación muestra A - Transferir 25,0 mg de
Mononitrato de Isosorbida a un matraz aforado de
25 ml, suspender en 20 ml de Fase móvil, sonicar
durante 15 minutos, y completar a volumen con
Fase móvil. Filtrar la suspensión a través de un
filtro de membrana.
Preparación muestra B - Transferir 1,0 ml de la
Preparación muestra A a un matraz aforado de
10 ml y completar a volumen con Fase móvil.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) -
Inyectar 20 µl de la Preparación estándar A. Ajustar
la sensibilidad del sistema de manera que la