VOLUMEN I

Pureza cromatográfica
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 210 nm y una columna de
25 cm 4,5 mm con fase estacionaria constituida
por octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 3 a 10 m de diámetro. Mantener
la columna aproximadamente a 50 ºC. El caudal
debe ser aproximadamente 2,0 ml por minuto.
Programar el cromatógrafo del siguiente modo:
Tiempo Solución A Solución B Etapa
(minutos) (%) (%)
0-30 15 85 Gradiente
lineal
Solución A - Ácido fosfórico diluido
(1 en 1.000) y acetonitrilo (70:30). Filtrar y desgasificar.
Solución B - Ácido fosfórico diluido
(1 en 1.000). Filtrar y desgasificar.
Fase móvil - Emplear mezclas variables de Solución
A y Solución B según se indica en Sistema
cromatográfico. Hacer los ajustes necesarios (ver
Aptitud del sistema en 100. Cromatografía).
Solución muestra - Preparar una solución de Cilastatina
Sódica en agua que contenga aproximadamente
1,6 mg por ml.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) -
Cromatografiar la Solución muestra y registrar las
respuestas de los picos según se indica en Procedimiento:
el factor de capacidad k’ no debe ser menor
de 10; la eficiencia de la columna no debe ser menor
de 3.000 platos teóricos; el factor de asimetría
no debe ser mayor de 4,5.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20 l) de la Solución muestra y agua (como blanco
de solvente) registrar los cromatogramas y medir
las respuestas de todos los picos.
Calcular la pureza cromatográfica, en porcentaje,
en la porción de Cilastatina Sódica en ensayo,
por la fórmula siguiente:
100r M /(r T –r B –r A )
en la cual r M es la respuesta del pico de cilastatina
obtenido a partir de la Solución muestra, r T es la
suma de las respuestas de todos los picos obtenidos
con la Solución muestra, r B es la suma de las respuestas
de todos los picos obtenidos con el blanco y
r A es la respuesta del pico correspondiente a sustancias
no retenidas, que pudieran estar presentes (como
por ejemplo acetona) y aparecer en el frente de
solvente del cromatograma obtenido a partir de la
Solución muestra. El porcentaje de pureza cromatográfica
no debe ser menor de 98,5 %.
Calcular el porcentaje de cada impureza en la
porción de Cilastatina Sódica en ensayo, por la
fórmula siguiente:
100r i /(r T –r B –r A )
en la cual r i es la respuesta del pico de cada impureza
individual obtenida a partir de la Solución muestra
y los términos restantes son los definidos anteriormente.
No debe contener más de 0,5 % de cualquier
impureza individual.
Límite de metales pesados
Método II. No más de 0,002 %.
Ensayo de endotoxinas bacterianas
Cuando en el rótulo se indique que Cilastatina
Sódica es estéril, no debe contener más de 0,17
Unidades de Endotoxina por mg de Cilastatina.
Ensayos de esterilidad
Cuando en el rótulo se indique que Cilastatina
Sódica es estéril, debe cumplir con los requisitos
cuando se ensaya según se indica en Método de
filtración por membrana; empleando 6 g de Cilastatina
Sódica en 200 ml de Solución A.
VALORACIÓN
Pesar exactamente alrededor de 300 mg de Cilastatina
Sódica, transferir a un erlenmeyer, agregar
30 ml de metanol y 5 ml de agua. Agregar ácido
clorhídrico 0,1 N hasta pH de aproximadamente 3.
Titular con hidróxido de sodio 0,1 N (SV) hasta el
tercer punto de inflexión. Calcular la diferencia del
volumen empleado, en ml, entre el primer y el tercer
punto de inflexión. Cada ml de hidróxido de
sodio 0,1 N equivale a 19,02 mg de
C 16 H 25 N 2 NaO 5 S.
ROTULADO
Cuando Cilastatina Sódica esté destinada a preparaciones
de administración parenteral, indicar en
el rótulo que es estéril.