VOLUMEN I

2 , b 3 , b 4 y b 5 que dan valores de
P
que no deben
diferir en más de un 5 % del valor declarado para
cada uno de los dextranos para calibrado, y de
180 ± 2 para la glucosa anhidra:
M
i
b e
5
a
M
2 3
b4
b1
Ki
b2Ki
b3K
i
y
M ( yM )/ y
P i i i
i1 i1
en la cual a es el número de bandas en que se ha
dividido el cromatograma; y i es la altura que separa
la línea de base del trazado del cromatograma en la
banda i; M i es el peso molecular en la banda i.
Validación del sistema cromatográfico
Inyectar el volumen elegido de la Solución de
validación del sistema de Dextrano a analizar.
Peso molecular medio total del dextrano para
validación - Calcular M
P
según de indica en
Calibración del sistema cromatográfico, empleando
los valores obtenidos para b 1 , b 2 , b 3 , b 4 y b 5 .
El ensayo solo será válido si el valor de es
a
M
P
de:
- 41.000 a 47.000 para el Dextrano 40 para
validación SR-FA.
- 67.000 a 75.000 para el Dextrano 60/70
para validación SR-FA.
Peso molecular medio de la fracción superior
de dextrano (10 %) - Calcular M
P
para la fracción
superior de dextrano (10 %) que eluye en la
banda n, por la fórmula siguiente:
n
n
M
P
= yiM
i
i1
i1
y
i
(4)
estando n definido por las fórmulas siguientes:
n
a
y i
,1
y i
i1 i1
n1
i1
0 (5)
y
a
y i
,1
y
i1
i
0 (6)
el las cuales a es el número de bandas en que se ha
dividido el cromatograma; y i es la altura que separa
la línea de base del trazado del cromatograma en la
banda i; M i es el peso molecular en la banda i.
El ensayo solo será válido si el valor de
M
P
para la fracción superior de dextrano (10 %) es de:
- 110.000 a 130.000 para el Dextrano 40
para validación SR-FA.
- 190.000 a 230.000 para el Dextrano 60/70
para validación SR-FA.
Peso molecular medio de la fracción inferior de
dextrano (10 %) - Calcular M
P
para la fracción
inferior de dextrano (10 %) que eluye en la banda
m, por la fórmula siguiente:
a
M ( yM )/ y
(7)
P i i i
im
im
estando m definido por las fórmulas siguientes:
a
im
a
a
y i
,1
y
i1
i
a
0 (8)
y
a
y i
,1
y i
im1 i1
0 (9)
el las cuales a es el número de bandas en que se ha
dividido el cromatograma; y i es la altura que separa
la línea de base del trazado del cromatograma en la
banda i; M i el peso molecular en la banda i.
El ensayo solo será válido si el valor de
M
P
para la fracción inferior de dextrano (10 %) es de:
- 6.000 a 8.500 para el Dextrano 40 para
validación SR-FA.
- 7.000 a 11.000 para el Dextrano 60/70
para validación SR-FA.
Distribución del peso molecular del dextrano
en ensayo
Inyectar el volumen elegido de la Solución
muestra. Calcular los valores de M
P
que corresponden
respectivamente a la distribución del peso
molecular total, a la fracción superior de dextrano
(10 %) y a la fracción inferior de dextrano (10 %)
según se indica en Validación del sistema cromatográfico.
El peso molecular promedio M
P
debe
estar entre 64.000 y 76.000. El peso molecular
promedio de la fracción superior (10 %) debe ser
como máximo 185.000 y el de la fracción inferior
debe ser como mínimo 15.000.