VOLUMEN I

BELLADONA, hoja
Definición - Belladona está constituida por las
hojas desecadas o mezcladas con sumidades floridas
y a veces con frutos, de Atropa belladona L.
(Solanaceae). Belladona debe contener no menos de
0,3 por ciento de alcaloides totales expresados como
hiosciamina y debe cumplir con las siguientes
especificaciones
Sustancias de referencia - Sulfato de Hiosciamina
SR-FA. Bromhidrato de Hioscina SR-FA
(Bromhidrato de Escopolamina).
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos bien cerrados, en sitio
fresco y seco.
ENSAYOS
Identificación
A - Características macroscópicas. Hoja levemente
discolor, verde a verde pardusco en el haz y
más clara en el envés, entera o rota, a menudo arrugada,
enrollada o aglomerada; limbo anchamente
ovado u oval-lanceolado, ápice acuminado y atenuado,
borde entero; pecíolo de hasta 4 mm de
longitud, deprimido, pubescente cuando joven, al
igual que la lámina. Ejes de las inflorescencias
comprimidos, con brácteas opuestas de tamaño
desigual y flores solitarias u ocasionalmente frutos
en sus axilas. Las flores, cuando presentes, tienen
cáliz gamosépalo y corola gamopétala campanulada.
El fruto es una baya globosa, de color verdoso a
negro, rodeado por el cáliz persistente con lóbulos
ampliamente extendidos, y contiene numerosas
semillas comprimidas, reniformes.
B - Características microscópicas. En vista superficial
de la lámina foliar, ambas epidermis presentan
células con paredes sinuosas, cutícula delgada
y estriada y numerosos estomas (anisocíticos y
ocasionalmente algunos anomocíticos), con mayor
densidad en la inferior; pelos tectores uniseriados, 2
a 6 celulares, con paredes lisas y finas; pelos secretores
de dos tipos: a) con cabezuela unicelular y pie
uniseriado pluricelular y b) con cabezuela pluricelular
y pie unicelular. Mesófilo con parénquima en
empalizada uniestratificado y 4 a 5 capas de parénquima
esponjoso con células repletas con arena
cristalina. Nervadura media biconvexa, con colénquima
subepidérmico hacia ambas superficies,
grupos de haces bicolaterales, aproximados entre sí
y dispuestos en forma de arco muy abierto.
C - Droga en polvo. Polvo verde o verde pardusco,
con olor fétido. Presenta vasos reticulados y
algunos anulares y espiralados; fibras procedentes
de los tallos; células características contendiendo
arena cristalina; cristales pequeños aislados; células
epidérmicas con cutícula estriada y estomas anisocíticos
y eventualmente anomocíticos; escasos pelos
de los tipos anteriormente descriptos; granos de
polen subesféricos a elipsoides, triaperturados;
fragmentos de la corola con células epidérmicas
papilosas y/o pelos tectores o secretores de los tipos
descriptos anteriormente; fragmentos pardoamarillentos
de las semillas, con células del tegumento
irregularmente esclerificadas y con punteaduras.
D - Agitar 1,0 g de Belladona, previamente reducida
a polvo con 10 ml de ácido sulfúrico 0,05 M
durante 2 minutos y filtrar. Agregar 1,0 ml de
amoníaco concentrado y 5,0 ml de agua. Agitar con
precaución para evitar la formación de emulsión,
con 15,0 ml de éter. Dejar separar las fases, extraer
la fase etérea y desecar sobre sulfato de sodio anhidro.
Filtrar y evaporar el éter en una cápsula de
porcelana. Agregar 0,5 ml de ácido nítrico fumante
y evaporar a sequedad en baño de agua. Agregar
10 ml de acetona y, gota a gota, una solución de
hidróxido de potasio en alcohol al 3 %. Debe desarrollar
una intensa coloración violeta.
E - Aplicar la siguiente técnica cromatográfica.
Fase estacionaria - Emplear una placa para
cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía)
recubierta de gel de sílice para cromatografía
con indicador de fluorescencia, de 0,25 mm de
espesor.
Fase móvil - Acetona, agua y amoníaco concentrado
(90:7:3).
Solución estándar - Disolver 50 mg de Sulfato
de Hiosciamina SR-FA en 9,0 ml de metanol y
agregar 1,8 ml de una solución de Bromhidrato de
Hioscina SR-FA, preparada disolviendo 15 mg de
Bromhidrato de Hioscina SR-FA en 10,0 ml de
metanol.
Solución muestra - A 600 mg de Belladona reducida
a polvo, agregar 15 ml de ácido sulfúrico
0,05 M y agitar durante 15 minutos y filtrar. Lavar
el filtro con ácido sulfúrico 0,05 M hasta obtener
20 ml de filtrado. Agregar 1 ml de hidróxido de
amonio concentrado y realizar dos extracciones con
10 ml de éter libre de peróxidos. Dejar separar las
fases, por centrifugación si es necesario y reunir las
fases etéreas. Secar sobre sulfato de sodio anhidro,
filtrar y evaporar la solución resultante hasta sequedad.
Disolver el residuo obtenido en 0,5 ml de
metanol.
Revelador 1 - Solución de iodobismutato de potasio
(SR).
Revelador II - Nitrito de sodio 0,1 M (SV).
Procedimiento - Aplicar en bandas por separado,
10 µl y 20 µl de la Solución estándar y 10 µl y
20 µl de la Solución muestra. Desarrollar los cro-