VOLUMEN I

partir de la Solución estándar. No debe contener
más de 0,10 %.
Pureza cromatográfica
MÉTODO I
Fase estacionaria - Emplear una placa para
cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía)
recubierta con gel de sílice para cromatografía
con indicador de fluorescencia, de 0,25 mm
de espesor.
Fase móvil - Cloroformo, acetato de etilo, metanol
e hidróxido de amonio (90:50:40:1).
Soluciones estándar - Disolver una cantidad
exactamente pesada de Clorhidrato de Ondansetrón
SR-FA en metanol y mezclar para obtener
una solución de aproximadamente 0,25 mg por ml.
Diluir esta solución cuantitativamente con metanol
para obtener Soluciones estándar con las siguientes
composiciones:
Solución
estándar
Dilución
Concentración
(µg por ml)
% con
respecto a la
muestra
A 1 en 5 50 0,4
B 1 en 10 25 0,2
C 1 en 20 12,5 0,1
Solución muestra - Disolver una cantidad exactamente
pesada de Clorhidrato de Ondansetrón en
metanol para obtener una solución de aproximadamente
12,5 mg por ml.
Solución de resolución - Disolver una cantidad
exactamente pesada de Impureza A de Ondansetrón
SR-FA en metanol y diluir cuantitativamente
y en etapas, si fuera necesario, con metanol para
obtener una solución de aproximadamente 100 µg
por ml.
Solución de identificación - Disolver una cantidad
exactamente pesada de Impureza B de Ondansetrón
SR-FA en metanol y diluir cuantitativamente
y en etapas, si fuera necesario, con metanol para
obtener una solución de aproximadamente 100 µg
por ml.
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la
placa 20 µl de la Solución muestra, 20 µl de las
Soluciones estándar A, B y C y 10 µl de la Solución
de identificación. Sobre la misma placa aplicar
20 µl de la Solución muestra y sobre ésta aplicar
10 µl de la Solución de resolución y 10 µl de la
Solución de identificación, para verificar la aptitud
del sistema. Desarrollar los cromatogramas hasta
que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente
tres cuartas partes de la longitud de la
placa. Retirar la placa de la cámara, marcar el frente
del solvente y dejar que se evapore. Examinar la
placa bajo luz ultravioleta a 254 nm y comparar la
intensidad de cualquier mancha secundaria observada
en el cromatograma obtenido a partir de la
Solución muestra con la intensidad de las manchas
principales en los cromatogramas de las Soluciones
estándar: el ensayo sólo es válido si los tres componentes
del cromatograma para verificar la aptitud
del sistema se resuelven completamente; cualquier
mancha secundaria en el cromatograma obtenido a
partir de la Solución muestra con valor de R f correspondiente
al de la mancha principal de la Solución
de identificación, no debe ser mayor en tamaño
e intensidad que la mancha principal obtenida con
la Solución estándar A (0,4 %); ninguna otra mancha
secundaria en el cromatograma obtenido a partir
de la Solución muestra debe ser mayor en tamaño
e intensidad que la mancha principal obtenida
con la Solución estándar B (0,2 %); y la suma de las
intensidades de las manchas secundarias obtenidas a
partir de la Solución muestra no debe ser mayor de
1,0 %.
MÉTODO II
Sistema cromatográfico, Fase móvil, Preparación
estándar y Aptitud del sistema - Proceder
según se indica en Valoración.
Solución muestra - Proceder según se indica en
Preparación muestra en Valoración.
Procedimiento - Inyectar en el cromatógrafo
aproximadamente 10 µl de la Solución muestra,
registrar el cromatograma y medir las respuestas de
todos los picos. Calcular el porcentaje de cada
impureza en la porción de Clorhidrato de Ondansetrón
en ensayo, en relación a la suma de las respuestas
de todos los picos. No debe contener más
de 0,2 % de cualquier impureza individual y la
suma de todas las impurezas no debe ser mayor
de 0,5 %.
VALORACIÓN
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 216 nm y una columna de
25 cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por grupos nitrilo unidos químicamente a partículas
porosas de sílice de 3 a 10 µm de diámetro. El
caudal debe ser aproximadamente 1,5 ml por minuto.
Fase móvil - Fosfato monobásico de potasio
0,02 M (previamente ajustado a pH 5,4 con
hidróxido de sodio 1 M) y acetonitrilo (50:50).
Filtrar y desgasificar. Hacer los ajustes necesarios
(ver Aptitud del sistema en 100. Cromatografía).
Preparación estándar - Disolver una cantidad
exactamente pesada de Clorhidrato de Ondansetrón
SR-FA en Fase móvil y diluir cuantitativamente
y en etapas, si fuera necesario, con Fase
móvil para obtener una solución de aproximadamente
90 µg por ml.