VOLUMEN I

de 100 ml, completar a volumen con agua y mezclar.
Solución estándar - Preparar una solución
1 en 50 de alcohol en agua. Determinar la densidad
relativa a 25 °C (ver 160. Determinación de la
densidad relativa) y obtener el porcentaje de
C 2 H 5 OH por referencia a la Tabla alcoholimétrica
en Tablas.
Preparación estándar - Transferir 4,0 ml de Solución
estándar y 5,0 ml de Solución del estándar
interno a un matraz aforado de 10 ml. Completar a
volumen con agua y mezclar. Inyectar 2 µl de esta
solución en el cromatógrafo de gases.
Preparación muestra - Pesar exactamente alrededor
de 500 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona,
transferir a un matraz aforado de 10 ml, agregar
5,0 ml de Solución estándar interno y mezclar
hasta disolver. Completar a volumen con agua y
mezclar. Inyectar 2 µl de esta solución en el cromatógrafo
de gases.
Cálculos - Calcular el porcentaje de alcohol en
la porción de Fosfato Sódico de Dexametasona en
ensayo por la fórmula siguiente:
4(S/P)(R M /R E )
en la cual S es el porcentaje de alcohol en la Solución
estándar, P es el peso en g de Fosfato Sódico
de Dexametasona empleado en la Preparación
muestra y R M y R E son las respuestas del pico de
alcohol, relativas al estándar interno, en la Preparación
muestra y la Preparación estándar, respectivamente.
El contenido de C 2 H 5 OH no debe ser
mayor de 8,0 %.
Fosfato inorgánico
Solución estándar de fosfato - Disolver
143,3 mg de fosfato monobásico de potasio seco en
agua y diluir a 1 litro. Esta solución contiene el
equivalente a 0,10 mg de fosfato en cada ml.
Reactivo para fosfato A - Disolver 5 g de molibdato
de amonio en ácido sulfúrico 1 N para obtener
100 ml.
Reactivo para fosfato B - Disolver 350 mg de
sulfato p-metilaminofenol en 50 ml de agua, agregar
20 g de bisulfito de sodio, mezclar hasta disolver
y diluir con agua a 100 ml.
Solución muestra - Pesar exactamente alrededor
de 50 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona,
transferir a un matraz aforado de 25 ml y disolver
en una mezcla de 10 ml de agua y 5 ml de ácido
sulfúrico 2 N, calentando si fuera necesario. Agregar
1 ml de Reactivo para fosfato A y 1 ml de Reactivo
para fosfato B, completar a volumen con agua,
mezclar y dejar reposar a temperatura ambiente
durante 30 minutos.
Solución estándar - En forma similar y en sucesión
inmediata, preparar una Solución estándar
empleando 5,0 ml de Solución estándar de fosfato
en lugar de 50 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona.
Procedimiento - Determinar concomitantemente
las absorbancias de ambas soluciones, en celdas
de 1 cm a 730 nm, con un espectrofotómetro, empleando
agua como blanco. La absorbancia de la
Solución muestra no debe ser mayor que la de la
Solución estándar. No debe contener más de 1,0 %
de fosfato.
Dexametasona libre
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
25 cm × 4,5 mm con fase estacionaria constituida
por grupos fenilo químicamente unidos a partículas
porosas de sílice de 5 µm de diámetro. El caudal
debe ser aproximadamente 1,2 ml por minuto.
Solución de trietilamina - Preparar una solución
que contenga 7,5 ml de trietilamina en 1 litro de
agua. Ajustar a pH 5,4 con ácido fosfórico.
Fase móvil - Solución de trietilamina y metanol
(74:26). Filtrar y desgasificar. Hacer los ajustes
necesarios (ver Aptitud del sistema en 100. Cromatografía).
Solución estándar - Disolver una cantidad exactamente
pesada de Fosfato de Dexametasona
SR-FA en Fase móvil para obtener una solución
de aproximadamente 0,5 mg por ml. Preparar una
segunda solución disolviendo una cantidad exactamente
pesada de Dexametasona SR-FA en una
mezcla de metanol y agua (1:1) para obtener una
solución de aproximadamente 50 µg por ml. Transferir
10,0 ml de la primera solución y 1,0 ml de la
segunda solución a un matraz aforado de 100 ml.
Completar a volumen con Fase móvil y mezclar.
Solución muestra - Pesar exactamente alrededor
de 50 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona,
transferir a un matraz aforado de 100 ml y disolver
con Fase móvil. Completar a volumen con Fase
móvil y mezclar. Diluir 5,0 ml de esta solución con
Fase móvil a 50,0 ml.
Solución de aptitud del sistema - Preparar una
solución en Fase móvil de aproximadamente 0,05 y
0,02 mg por ml de Fosfato de Dexametasona
SR-FA y de Dexametasona SR-FA, respectivamente.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) -
Cromatografiar la Solución de aptitud del sistema y
registrar las respuestas de los picos según se indica
en Procedimiento: la eficiencia de la columna determinada
para el pico principal no debe ser menor
de 900 platos teóricos; el factor de asimetría para el