VOLUMEN I

Albúmina humana, disolución de
ALBÚMINA HUMANA
SOLUCIÓN
Definición - La Solución de Albúmina Humana
es una solución acuosa de proteínas obtenidas a
partir de plasma que debe cumplir los requisitos de
Plasma Humano para Fraccionamiento.
Caracteres generales - Líquido límpido,
ligeramente viscoso, prácticamente incoloro,
amarillo, ámbar o ligeramente verdoso.
Sustancias de referencia - Albúmina Humana
para Electroforesis SR-FA. Albúmina Humana
para Validación del Ensayo de Aluminio SR-FA.
PRODUCCIÓN
La separación de la albúmina se lleva a cabo en
condiciones estrictamente controladas, en particular
en lo concerniente a pH, fuerza iónica y
temperatura, de manera tal que en el producto final
no menos del 95 por ciento de las proteínas totales
sea albúmina. La Solución de Albúmina Humana
puede prepararse como solución concentrada
conteniendo de 150 g por litro a 250 g por litro de
proteínas totales, o como solución isotónica
conteniendo de 35 g por litro a 50 g por litro de
proteínas totales. Se puede agregar un estabilizante
que proteja a la solución de los efectos del calor,
como por ejemplo caprilato de sodio (octanoato de
sodio) o N-acetiltriptofano o una combinación de
ambos a una concentración apropiada. No se deben
agregar conservantes antimicrobianos en ninguna
fase de la preparación. La solución se filtra a través
de una membrana capaz de retener bacterias, se
distribuye asépticamente en envases estériles que
posteriormente se cierran para prevenir cualquier
contaminación. La solución en su envase final se
calienta a 60 ± 1 ºC y se mantiene a esta
temperatura durante por lo menos 10 horas.
Seguidamente, los envases se incuban entre 30 y
35 ºC durante no menos de 14 días, o entre 20 y
25 ºC durante no menos de 4 semanas y se realiza
un examen visual de los envases para examinar
evidencias de contaminación microbiana.
CONSERVACIÓN
Mantener protegido de la luz.
ENSAYOS
Identificación
Examinar la preparación mediante una técnica
apropiada de inmunoelectroforesis (ver 635.
Métodos inmunoquímicos). Comparar el suero
humano normal con la preparación en ensayo,
ambos diluidos hasta una concentración de 10 g por
litro de proteína, utilizando un antisuero contra
suero humano normal. El componente principal de
la preparación en ensayo debe tener la misma
movilidad del componente principal del suero
humano normal. La preparación puede contener
también pequeñas cantidades de otras proteínas
plasmáticas.
Determinación del pH
Entre 6,7 y 7,3. Diluir la preparación en ensayo
con una solución de cloruro de sodio 9 g por litro
hasta una concentración de 10 g por litro de
proteínas.
Proteínas totales
Diluir la preparación a examinar, si fuera
necesario, con una solución de cloruro de sodio 9 g
por litro para obtener una solución de
aproximadamente 15 mg de proteína en 2 ml.
Transferir 2,0 ml a un tubo de centrífuga de fondo
redondo y agregar 2,0 ml de una solución de
molibdato de sodio 75 g por litro y 2,0 ml de una
mezcla de agua y ácido sulfúrico libre de nitrógeno
(30:1). Agitar, centrifugar durante 5 minutos,
decantar el sobrenadante líquido y dejar escurrir el
tubo invertido sobre un papel de filtro. Determinar
el contenido de nitrógeno en el residuo (ver
200. Determinación de nitrógeno) y calcular el
contenido de proteínas multiplicando el resultado
por 6,25. [NOTA: si el producto contiene un
estabilizante cuya molécula contiene nitrógeno,
puede utilizarse otro método alternativo validado
para determinación de proteínas.] El contenido de
proteínas no debe ser menor a 95 % ni mayor a
105 % de la cantidad declarada en el rótulo.
Composición en proteínas
Examinar por electroforesis de zona (ver 300.
Electroforesis), empleando como soporte tiras de
gel de acetato de celulosa y como solución de
electrolitos una solución reguladora barbital pH 8,6
(ver Soluciones reguladoras en Reactivos y
Soluciones).
Solución muestra - Diluir la preparación en
ensayo con una solución de cloruro de sodio 9 g por
litro hasta una concentración de proteínas de 20 g
por litro.
Solución estándar - Diluir Albúmina Humana
para Electroforesis SR-FA en una solución de
cloruro de sodio 9 g por litro, hasta una
concentración de proteínas de 20 g por litro.
Procedimiento - Aplicar sobre una tira 2,5 µl de
la Solución muestra en una banda de 10 mm, o bien
aplicar 0,25 µl por milímetro si se emplea una tira