VOLUMEN I

25 cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por gel de sílice de 10 µm de diámetro químicamente
unido a un revestimiento de intercambio catiónico
fuertemente ácido. El caudal debe ser aproximadamente
1,5 ml por minuto.
Fase móvil - Agua y acetonitrilo (60:40) que
contenga 0,5 ml de ácido fosfórico por cada
1.000 ml. Filtrar y desgasificar. Hacer los ajustes
necesarios (ver Aptitud del sistema en 100. Cromatografía).
Preparación estándar - Transferir cantidades
exactamente pesadas de Levotiroxina SR-FA y
Liotironina SR-FA a un envase apropiado, disolver
en Fase móvil y diluir cuantitativamente y en etapas
con Fase móvil para obtener una solución de
aproximadamente 10 µg de levotiroxina por ml y
0,2 µg de liotironina por ml.
Preparación muestra - Pesar exactamente alrededor
de 100 µg de Levotiroxina Sódica y transferir
a un tubo de centrífuga. Agregar 2 perlas de vidrio
y 10 ml de Fase móvil y mezclar empleando un
mezclador por vórtice durante 3 minutos. Centrifugar
hasta obtener un líquido sobrenadante transparente,
filtrando si fuera necesario.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) -
Cromatografiar la Preparación estándar y registrar
las respuestas de los picos según se indica en Procedimiento:
la resolución R entre los picos de liotironina
y levotiroxina no debe ser menor de 5,0; la
desviación estándar relativa para inyecciones repetidas
no debe ser mayor de 2,0 %.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
100 µl) de la Preparación estándar y la Preparación
muestra, registrar los cromatogramas y medir
las respuestas de los picos principales. Calcular la
cantidad de C 15 H 10 I 4 NNaO 4 en la porción de Levotiroxina
Sódica en ensayo, a partir de las respuestas
de los picos de levotiroxina obtenidos con la Preparación
muestra y la Preparación estándar.