VOLUMEN I

pesos moleculares se determina también después de
la modificación química del polisacárido.
La cromatografía líquida con detección de
dispersión de luz láser de múltiple ángulo puede ser
también utilizada para la determinación de la
distribución de peso molecular. Se puede utilizar
una determinación validada del grado de
polimerización o del peso promedio del peso
molecular y de la dispersión de masas moleculares
en lugar de la determinación de la distribución del
peso molecular.
Tabla 1 - Características del producto y especificaciones del PRP y del proteína transportadora para los
productos actualmente aprobados.
Tipo
Toxoide
diftérico
Toxoide
tetánico
Proteína
diftérica CRM
197
OMP
(Complejo
proteico de
membrana
externa
Meningococo
grupo B)
Vector Polisacáridol de Haemophilus Conjugación
Cantidad
Cantidad Método de
Pureza nominal Tipo de PRP nominal por acoplamiento
por dosis
dosis
> 1.500
Lf/mg de
nitrógeno
> 1.500
Lf/mg de
nitrógeno
> 90 %de
proteína
diftérica
Vesículas de
la membrana
proteica
externa; ≤
8 % de
polisacárido
18 µg
20 µg
25 µg
125µg o
250 µg
PRP tamaño
reducido
k D : 0,6-0,7
utilizando
agarosa
reticulada para
cromatografía
PRP ≥50%
≤k D : 0,3
utilizando
agarosa
reticulada para
cromatografía
PRP tamaño
reducido
D P = 15-35 o 10-
35
25 µg
10 µg
10 µg
PRP tamaño
reducido
k D < 0,6
utilizando
7,5 µg o 15 µg
agarosa
reticulada para
cromatografía Ro
M W > 50x10 3
Activación
del PRP
con
bromuro
de
cianógeno
Mediado
por
cabodiimida
Aminación
reductiva
(método
de un
paso) o
activación
de N-
hidroxisuc
ci-nimida
Enlace
tioéter
Procedimiento
Toxoide de la
difteria activada
( D-AH + ), PRP
activado con
bromuro de
cianógeno,
vacuna
conjugada
PRP activado por
ADH
(PRP cov-AH) +
Toxoide tetánico
+ EDAC-vacuna
conjugada
Acoplamiento
directo del PRP
al CRM 197
(cianoborohidrur
o activado)
Activación PRP
por CDI PRP-IM
+ BuA2 + BrAc
= PRP-BuA2-
BrAc + OMP
tioactivado-
ADH = dihidrazida del ácido adípico
BrAc = cloruro de bromoacetilo
BuA2 = butano-1,4-diamida
CDI = carbonildiimidazol
Dp = grado de polimerización
EDAC = 1- etil-3(3-dimetilaminopropil) carbodiimida
IM = imidazol
M W = masa media del peso molecular